Przedmiotem wynalazku jest polimeraza DNA Efa pochodząca z bakteriofaga vB_EfaS-271, zdolna do szybkiej i wydajnej izotermicznej amplifikacji DNA w szerokim zakresie temperatur, od -10°C do 50°C. Enzym działa efektywnie w temperaturze pokojowej, co umożliwia prowadzenie reakcji bez specjalistycznego sprzętu.
Polimeraza Efa wyróżnia się aktywnością 5’-3’ oraz funkcją korekcyjną 3’-5’, a także unikalną sekwencją aminokwasową (~20% zgodności z innymi polimerazami). W testach umożliwiała uzyskanie produktów amplifikacji (~40 pz) w około 5 minut, zachowując aktywność także poniżej 0°C.
Proces jej produkcji jest prosty i energooszczędny, bez konieczności chłodzenia etapów oczyszczania. Wynalazek obejmuje również sekwencję genu, konstrukcję wektora ekspresyjnego oraz zoptymalizowaną procedurę otrzymywania enzymu. Technologia znajduje zastosowanie w diagnostyce, detekcji patogenów, analizach genetycznych i pracy terenowej.
Zastosowanie:
- Diagnostyka molekularna w warunkach terenowych i bez dostępu do termocyklera,
- Testy detekcji patogenów oparte na niskotemperaturowej amplifikacji DNA,
- Analizy genetyczne, genotypowanie i identyfikacja mutacji.
