Proponowaną technologię stanowi immunoczujnik do wykrywania wirusa grypy, zawierający na powierzchni elektrody złotej warstwę tiobisbezenotiolu, z osadzonym przeciwciałem monoklonalnym będącym fragmentem przeciwciała scFvl rozpoznającym hemaglutyninę (HA) oraz metoda wytwarzania immunoczujnika. Sposób wytwarzania immunoczujnika obejmuje etapy, w których oczyszcza się złotą elektrodę, następnie umieszcza się ją w roztworze tiobisbezenotiolu (TBBT) i nakrapla się na ich powierzchnie roztwór złota koloidalnego, po czym osadza się przeciwciało monoklonalne lub jego fragment swoiście rozpoznające hemaglutyninę (HA) lub jego fragment. Zastosowane w immunoczujniku mysie przeciwciało monoklonalne lub jego fragment specyficznie rozpoznaje hemaglutyninę (HA) z wirusa A/swan/Poland/305-135V08/2006) i może być wykorzystane do wykrywania wirusa grypy, a w szczególności wirusa ptasiej grypy typu H5N1.
Wybrane informacje:
- immunoczujnik będący przedmiotem wynalazku, oparty na przeciwciałach monoklonalnych może być wykorzystany w diagnostyce i terapii chorób infekcyjnych, autoimmunologicznych i nowotworowych. Umożliwia on przeprowadzenie procesu diagnostycznego na najwyższym poziomie wydajności.
- rozwój technik inżynierii genetycznej umożliwia projektowanie i otrzymywanie przeciwciał o pożądanych właściwościach, w tym przeciwciał monoklonalnych i ich pochodnych.
Immunoczujniki są typem biosensorów i służą do detekcji analitu na podstawie specyficznych interakcji przeciwciało-antygen. Posiadają możliwość detekcji komórek zwierzęcych, roślinnych, bakteryjnych, a także białek i cukrowców. Główne zalety immunoczujników to: prostota wykonania z możliwością miniaturyzacji, małe objętości próbki wymagane do analizy i możliwość oznaczania antygenów nawet w złożonych mieszaninach, np. w surowicy lub ekstrakcie z liści. Cechy te pozwalają na ich liczne zastosowania takie jak analiza patogenów, pestycydów, mikroorganizmów, toksyn i antybiotyków.
Przedmiotem wynalazku są: monoklonalne przeciwciało mysie, rekombinowane białko fuzyjne, zastosowanie przeciwciał, immunoczujnik do wykrywania wirusa grypy oraz sposób wytwarzania immunoczujnika. Grypa jest zakaźną, wirusową chorobą układu oddechowego, której naturalnym i największym źródłem zakażenia są wędrujące ptaki wodne, powodujące infekcje ptactwa domowego. Wirus grypy cechuje się znaczną zmiennością genetyczną oraz zdolnością do mutacji. Znane są szczepy o wysokiej patogeniczności, które mogą powodować znaczną śmiertelność wśród drobiu i przyczyniać się do ogromnych strat materialnych dla hodowców drobiu. Szczepy te zazwyczaj nie występują pośród dzikiego ptactwa. Pojawiają się one najczęściej u drobiu przetrzymywanego w dużych skupiskach oraz złych warunkach sanitarnych. Niezbędne są zatem szybkie, czułe, proste w użyciu i tanie metody specyficznego wykrywania różnych typów wirusa grypy oraz identyfikacji szczepów. Ma to szczególnie istotne znaczenie dla Polski jako czołowego producenta drobiu w Unii Europejskiej.
Proponowany immunoczujnik może również znaleźć zastosowanie w diagnostyce i terapii chorób nowotworowych, autoimmunologicznych i infekcyjnych.